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    qEV高纯度外泌体分离柱

           
            qEV是一种根据尺寸排阻原理SEC(Size exclusion Chromatography)设计的细胞外囊泡(外泌体)分离-纯化技术,由新西兰Izon公司研发和生产。qEV可以从细胞培养上清液或复杂生物体液中快速、简便、无损地提取细胞外囊泡(外泌体),无需复杂的前处理和试剂准备。

            qEV技术有效避免了超速离心和密度梯度离心等传统方法分离囊泡(外泌体)时,由于超高离心力与蔗糖溶液高粘性造成的HDL蛋白或囊泡的聚集污染,也避免了传统方法对于囊泡(外泌体)的膜结构的损伤,使其保留完整的生物活性。

    qEV产品优势


    1. 快速提取(仅需约 15 分钟);

    2. 污染背景蛋白去除率>99%;

    3. 高密度脂蛋白(HDL)去除率>95% ;
    4. 保持细胞外囊泡的完整性和生物功能;
    5. 可分离指定粒径大小的外泌体;

    6. 按照ISO13485质量标准制造;

    7. 尤其适用于外泌体功能研究中,用于细胞培养或动物注射的高纯度外泌体的获得。
    8.  适用于多种类型样品的外泌体提取,包括:血清、血浆、尿液、细胞上清、脑脊液、唾液、房水、宫腔灌洗液、腹水、胸水、胆汁、蜂王浆、牛奶等;



    qEV.png

    qEV工作原理

           
            qEV是采用尺寸排阻SEC原理按照分子粒径进行分段分离的方法。基本原理如图1所示,将生物样品流经具有固定孔隙的SEC填充物,吸附粒径较小的分子如蛋白脂类等,而较大粒径的分子或颗粒不能进入孔隙。在缓冲液的作用下,较大粒径的囊泡(外泌体)流速快,在特定的阶段会被洗脱出来进入样品收集管,成为实验样品。而小分子具有较长的保留时间,最后被洗脱出来


    SEC排阻法.png

    图1 尺寸排阻SEC原理图

    qEV使用步骤(以qEVoriginal产品为例)


    使用qEV尺寸排阻分离柱分离囊泡(外泌体)只需15分钟。

    1、用PBS冲洗柱。

    2、用移液管将500μl样品移到柱上。

    3、向分离柱中添加PBS以洗脱囊泡(外泌体)。

    4、按500μl组分收集囊泡(外泌体)。

     


    收集结果展示.png

    图2 qEV收集结果展示


            用
    qNano系统对qEV收集的囊泡(外泌体)进行定量测量。图2显示了从血清样品中收集的组分的分析。在280纳米处用吸光度法测定蛋白质的相对浓度。数据表明,收集的第7至9组分具有最高浓度的囊泡(外泌体),而污染的血清蛋白洗脱的分数为第11至30组分(左图)。通过比较分离前和分离后的囊泡(外泌体)与蛋白质浓度比,第7组分的囊泡富集量为蛋白质的6000倍(右图)。根据样品的不同,如果下游分析分别需要更高的囊泡(外泌体)纯度或更高的囊泡(外泌体)产量,可将第7至9部分或第7至11部分汇集在一起。

     qEV产品规格

     

    qEV.png

     

    qEV产品规格.png

     

    相关文献


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