外泌体研究详细

EIQ3外泌体提取试剂盒 > 外泌体提取试剂盒(EIQ3)

    外泌体提取试剂盒(EIQ3)


            外泌体(Exosome)是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的直径30-150nm的纳米级脂质包裹体结构,密度1.13-1.21g/ml,内部包裹了蛋白质、mRNA和microRNA等物质,天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳等。越来越多的证据表明,对外泌体的分析和检测可以辅助疾病的早期诊断、疗效评价和预后分析。

     

    1.jpg

    ——F1000 Biol Rep. 2011.
    PMID: 21876726



            获得高纯度的大量外泌体样本是开展外泌体研究的基础,也是保障研究结果准确性的前提。经典的超速离心法(差速离心)、密度梯度离心法、免疫磁珠法、超滤法在外泌体制备过程中经常受到大型仪器设备的资源限制,并且存在操作复杂、耗时、外泌体量少、纯度低、价格高等缺陷。因此,试剂盒法逐渐成为外泌体提取方法中的主流技术,可帮助绝大多数科研人员获得高质量外泌体。

    华盈生物外泌体提取试剂盒


            华盈生物自主研发的Exosome Isolation Q3(简称EIQ3)系列外泌体提取剂盒,不仅有效提高外泌体得率,同时能够显著减少杂蛋白残留(如血清高丰度蛋白)。该试剂盒可以实现血清、血浆、尿液、细胞上清等液质样本中外泌体的快速提取,为后期外泌体研究的数据稳定性和可靠性提供保障。

    货号                   产品名称                               规格                 说明      血清外泌体提取试剂盒           150 rxns          以200μL 血清样本为一次反应
          血浆外泌体提取试剂盒           150 rxns          以200μL 血浆样本为一次反应
          尿液外泌体提取试剂盒           10 rxns            以10mL 尿液样本为一次反应
          细胞上清外泌体提取试剂盒    10 rxns            以10mL 细胞上清样本为一次反应

                                                     点击货号下载试剂盒操作说明书

    一、外泌体试剂盒特点

    • 外泌体纯度高(Quality)  

    • 外泌体得率高(Quantity)

    • 操作简便,周期短(Quick)

    未标题-1_画板 1.png

    二、外泌体试剂盒实用效果展示


            应用华盈生物EIQ3系列外泌体提取试剂盒提取的外泌体,可用于不同的外泌体鉴定实验,包括电镜观察,NTA分析,Western Blot鉴定外泌体marker等。以下实测结果以血清/尿液外泌体提取数据为例进行展示和分析:



    003.jpg

     

            Nanosight对华盈生物EIQ3-01001试剂盒三次平行实验富集的血清外泌体进行浓度和粒径检测,显示出良好的重复性,粒径均一,平均粒径为127.4nm,外泌体数量级达到1011/ml。



    外泌体电镜.png



        


           电镜结果显示,华盈生物EIQ3系列试剂盒在血清和尿液中富集的外泌体,其数量和结构均较好,外泌体呈囊泡状(经典茶托结构),粒径大小约为30-150nm。



    试剂盒比较.png



            与国外同类型试剂盒相比,华盈生物EIQ3-01001试剂盒富集的血清外泌体,其数量与总蛋白量比值最高,提示EIQ3-01001富集的血清外泌体纯度更高,更有助于外泌体蛋白组的检测与分析。


    幻灯片5.jpeg




            Western  Blot对EIQ3-01001富集的血清外泌体特定marker进行鉴定,可见条带清晰锐利。特别重要的是,EIQ3-01001对于血清高丰度蛋白Albumin和IgG(L)有更显著去除作用,更适合下游蛋白组学检测分析。

    三、EIQ3试剂盒   VS   其他方法

     

    幻灯片2.jpeg

     

    四、外泌体试剂盒使用方法

     

    幻灯片4.jpeg 

     

    外泌体提取相关FAQ


    1)使用华盈生物外泌体提取试剂盒耗时多久?
    以血清外泌体提取为例,样本预处理后,仅需要90分钟即可完成外泌体的收集工作。不同样本的外泌体提取试剂盒稍有差异,具体请参考说明书。 

    2)一次反应能提取多少外泌体?
    外泌体提取数量与样品类型相关。相同类型样本,如细胞上清样本,由于细胞类型的差异或者处理的差异,对提取的外泌体数量都有很大的影响。应用华盈生物外泌体提取试剂盒,200μl血清样本收集的外泌体蛋白量约为500μg(BCA法检测),对应的外泌体数量级可达在1011(NTA检测)。 

    3)提取的外泌体保存条件是怎样的?
    建议将提取好的外泌体分装后保存在-80℃,避免反复冻融。 

    4)外泌体的蛋白组学提供分析吗?
    不管是通过质谱还是芯片技术进行的外泌体蛋白组学研究,我们均可提供进一步的生物信息学分析。如GO分析、Pathway分析、聚类分析、IPA高级分析、个性化分析等。 

    5)是否提供外泌体提取、鉴定、分析等一系列的服务?
    华盈生物根据主流外泌体研究策略,开发了一套完整的外泌体蛋白质组学研究技术服务体系。提供从外泌体收集、鉴定到蛋白质组定性定量、数据分析一系列的技术服务项目,确保外泌体研究在同样技术标准下获得高质量研究数据。


    相关文献

    1. Ander Arbelaiz, et al.  Hepatology. 2017.

    2. Chen I H, et al. Proc Natl Acad Sci USA, 2017.

    3. Haraszti R A, et al.  J Extracell Vesicles, 2016.

    4. Hurwitz S N, et al.  Oncotarget, 2016.

    5. Clark D J, et al.  Anal Chem, 2015.

    6. Hoshino A, et al.  Nature, 2015.